用siRNA做干扰效果不错,为什么把这个序列包装成病毒做干扰效果就不好了?
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小脑斧123
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2023-08-30 •
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最后更新于 2023-08-30
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siRNA和shRNA的作用机制不同。siRNA是直接化学合成的双链小干扰RNA,通常在细胞质中聚集,直接与目的基因靶点结合,因此干扰效率较高。shRNA通常需要质粒或病毒载体导入靶细胞的细胞核内。根据驱动表达的启动子的不同,shRNA可被RNA聚合酶II或者III催化转录。在转运到细胞质之前,这些初始的前体结构需要首先被加工形成pre-shRNA。pre-shRNA随后被酶切,去除发卡结构,产生在3‘末端带有两个游离碱基的21-23nt的双链siRNA,siRNA与目的基因靶点结合,这个过程可能因为拷贝数低,转录过程复杂导致干扰效果不佳。