IP后的WB结果中背景很高,有办法让图好看一点吗?
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11111_
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2023-12-20 •
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IP(inmunoprecipitation)后的WB结果中背景很高,有办法让图好看一点吗?
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最后更新于 2023-12-20
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图好看主要可以通过以下几种方式让背景更干净:1.制备样品中可能有不完全溶解的大的蛋白复合体,可以在制备样品后进行短暂的超声处理,然后离心纯化,取上清进行实验;2.也可能是洗涤不彻底,多次洗涤并逐渐增加洗涤缓冲液中的NaCl和去垢剂浓度;3.或者是非特异性蛋白吸附在了磁珠上,需要进行预处理防止非特异性吸附;4.使用了过多的细胞或者组织进行裂解,减少细胞或组织用量,调整裂解物浓度到1ug/ml。